Enzim immunoassay indikátorok lebontásával

A kapcsolódó tudományok, például a genetika, a molekuláris biológia, a kémia fejlődésével, valamint a technológiai fejlődés növekedésével a modern orvostudomány innovatív módszerekkel büszkélkedhet az emberi betegségek széles skálájának diagnosztizálására. Ezeket az eredmények nagy pontossága és a teljesítmény biztonsága jellemzi. Az egészségügyi problémák azonosításának egyik módja az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat. Az elmúlt évtizedben széles körben népszerűvé vált, és hírnevet szerzett egy rendkívül hatékony, megbízható és betegbarát módszerként a betegségek kimutatására még a külső tünetek megjelenése előtt is. Könnyen megmagyarázjuk, mi az ilyen típusú diagnózis, mi a működésének alapelve, felhívjuk a figyelmet az előnyökre, az elemzés költségeiben fogunk tájékozódni.

A test reakciója a kórokozó növényekre

Annak megértése érdekében, hogy egy laboratóriumi technikus egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatnak köszönhetően diagnosztizálja a különféle betegségeket, meg kell értenie azt a fiziológiai folyamatot, amely a testben a fertőzésekkel való fertőzés során zajlik. Amikor egy patogén mikroorganizmus belép a véráramba, az emberi immunrendszer védő reakciót mutat bizonyos anyagok - ellenanyagok - felszabadulása formájában. A sejtekhez kötődnek, és megvizsgálják, hogy az a test része vagy kívülről behatolt-e. Ha az immunrendszer megállapítja, hogy a sejt idegen, akkor az ellenanyagok száma növekedni kezd a kórokozó mikroorganizmus leküzdése érdekében.

Az antitestek számos formában vannak, és megvannak a sajátosságai. Egyes anyagok közvetlenül a fertőzés időszakában jelennek meg, mások az egész életben az emberi testben maradnak, és ezeknek köszönhetően stabil immunitást alakítanak ki egy adott betegség ellen. A fehérjeszerkezeteket a következő típusokra osztjuk: A, D, E, M, G. Az orvostudományban az ellenanyagokat immunoglobulinoknak nevezzük. Ezért szokás, hogy ezen anyagok mutatóit Ig latin betűkkel jelölik.

Az enzim-kapcsolt immunszorbens vizsgálat (ELISA) az orvosi ismeretekből származó adatokra épül. Speciális antigének felhasználásával a laboratóriumban meg lehet határozni bizonyos antitestek jelenlétét vagy hiányát a biológiai anyagban. Az ilyen elemzés eredményei alapján az orvos diagnosztizálhat, és nemcsak a patológia jelenlétét, hanem annak eredetének korlátozását is meghatározhatja a beteg veszélyességi szintjének meghatározása céljából. Egy enzim immunvizsgálat során az M és G csoportok antitesteinek jelenlétét vizsgálják leggyakrabban..

Mi az IFA??

Valójában egy enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat nem újítás a modern társadalomban. A 80-as években fedezték fel. De az ilyen tanulmányok elvégzéséhez nagyméretű, drága felszerelésre volt szükség. Ezért ezt a módszert csak speciálisan felszerelt tudományos laboratóriumokban használták: sejtek és szövetek tipizálására használták. De akkor nem terjedt el széles körben a diagnosztikai orvostudományban, technikailag nehéz és rendkívül költséges volt a használata. Csak a technológia fejlesztésével és a biopolimer anyagok feltalálásával javult az ELISA. Ezután a módszer népszerűvé vált, és bizalmat szerezhetett az orvosi körökben.

Mint fentebb már említettük, ez a módszer magában foglalja az immunoglobulinok bizonyos csoportjainak kimutatását a biomatermékben - vér, amniotikus folyadék, üveges vagy cerebrospinális folyadék..

Vannak olyan tanulmányok, amelyekben antigént nem alkalmaznak a felületre, és enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot végeznek, amely magában foglalja a reakciót speciális lyukakban. Ez utóbbi módszer nagy érzékenységgel és megbízhatósággal rendelkezik, ezért az orvosi laboratóriumokban ilyen módon végeznek elemzést az emberi betegségek kimutatására.

Enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat

Az állítólagos betegségtől függően az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálati készletből a szükséges antigént használják, amely a kémiai reakció során fertőzés jelenlétében kötődik a kórokozó flórahoz. Ezt a folyamatot immunválasznak nevezik..

Ezután a vizsgálat eredményének vizuális meghatározása érdekében végezzen ELISA enzimatikus fázist. Ez magában foglalja az anyag festését speciális reagensekkel. Ebben a tanulmányban enzimeket, például lúgos foszfatázt, peroxidázt és avidint használnak. A kémiai reakciók során kapott színtől függően meghatározzuk az enzim immunoassay eredményét.

Mi az a kolorimetria??

A diagnózis enzimatikus fázisának elemzését a "kolorimetriának" nevezett módszer alkalmazásával végezzük. A tény az, hogy nemcsak az anyag színe ad információt a fertőzésről, hanem a kémiai reakciók eredményeként fellépő színsűrűség is. Ez a mutató határozza meg a kórokozó mikroorganizmus koncentrációját. Ha a diagnosztikai kézi módszert régi módon használják, akkor egy speciális kalibrációs grafikont kell készíteni ezeknek a mutatóknak a meghatározására.

A modern laboratóriumokban manapság ritkán használják a kézi módszert. Az ELISA elemzéséhez egy speciális készüléket használnak - egy kolorimétert, amelyben csak a kutatási paramétereket manuálisan állítják be, majd az összes munkát, beleértve a rajzolást is, automatikusan elvégzik..

ELISA módszerek

Vannak közvetlen és közvetett enzim immunoassay módszerek. Az első nézet kevesebb időt vesz igénybe, mivel csak 3 végrehajtási szakaszból áll. Először specifikus ellenanyagokat adunk a vizsgált anyag antigénjeihez, amelyeket speciális lyukakba helyezünk. Ezután távolítsa el a fölösleges mennyiséget, és végezze el az elemzés enzimatikus fázisát, így megkapva az eredményt.

Az indirekt módszert sokkal gyakrabban használják, mivel nagyobb érzékenységgel rendelkezik, mint a közvetlen diagnosztikai módszer. Ennek elvégzésekor kettős tanulmányt kell használni. Nevezetesen, az antigént először egy nem jelölt ellenanyaggal, majd egy jelölt ellenanyaggal asszociálják. Ez a folyamat több időt vesz igénybe, de az eredmény a legpontosabb..

Reagenskészletek

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálati készleteket különféle gyártók gyártják, különféle konfigurációkban. Oroszországban az elismert vállalat az Orvosi és Biológiai Szövetség. Ez a gyártó reagenskészleteket állít elő szinte valamennyi szélességi körünkön általános fertőzés ELISA vizsgálatához, amelyet így lehet elemezni. Maguk a reagensek mellett további anyagokat tartalmaznak a készletben, amely biztosítja az elemzés biztonságát, kényelmét és gyorsaságát. Ezenkívül a kémiai anyagokat különböző színűekre festették, ami csökkenti a hiba valószínűségét a reagens laboratóriumi asszisztens kiválasztásakor.

A kémiai-biológiai készletek különböznek egymáshoz viszonyítva, ami közvetlenül befolyásolja az enzim immunoassay eloszlását és elérhetőségét a lakosság számára.

A diagnosztikai módszer előnyei

Kétségtelen, hogy az enzim immunoassay számos előnnyel rendelkezik más diagnosztikai módszerekhez képest:

  1. Ezzel még a kórokozó szervezetek jelentéktelen jelenlétét is meghatározhatja, ami a teszt magas érzékenységét jelzi..
  2. A betegség legkorábbi szakaszában történő felismerésének képessége, amely jelentősen növeli a sikeres gyógyítás esélyét.
  3. A biológiai anyag egyszerűvé tétele és kényelme. Az ilyen elemzéseket mind magán, mind állami laboratóriumokban végzik. Szükség esetén a nővér otthon veheti az anyagot a betegtől.
  4. Az elemzés nagyon kis mennyiségű biológiai anyagot igényel.
  5. Gyors eredmény. A modern orvosi berendezések lehetővé teszik az elemzés elvégzését a nap folyamán.
  6. A fertőzés látens, tünetmentes formáinak felismerésének képessége.
  7. Tanulmányi akadálymentesség.
  8. Szükség esetén tömeges felmérések végezhetők ezzel a módszerrel..
  9. Lehetséges nyomon követni a betegség előrehaladását és az előírt kezelés hatékonyságát, mivel számos alkalommal elvégezhető egy ELISA elemzés, amely teljesen biztonságos a beteg számára.
  10. Az elemzés szakaszai automatizálása, amely kiküszöböli az emberi tényezőt és növeli az eredmények megbízhatóságát.
  11. Az ELISA reagenseit hosszú ideig - körülbelül egy évig - tárolják.
  12. Az elemzés lehetséges a környezeti hőmérséklet ingadozásaival..

M csoport immunoglobulinok

Az M csoport antitesteket az immunrendszer közvetlenül idegen antigén kimutatása után állítja elő. Tehát, ha az enzim immunoassay az ilyen anyagok biomateráliában történő kimutatásával véget ért, akkor ez jelzi a betegség akut stádiumát, az elsődleges fertőzést. Az M csoport immunoglobulinjai a fertőzés típusától függően akár egy hónapig is lehetnek a testben. Ezután számuk csökken a teljes eltűnésig.

G csoport immunoglobulinok

Úgy tűnik, hogy a G típusú protein struktúrák helyettesítik az M csoport immunoglobulinjait, ezek az anyagok stabil, legtöbb esetben egész életen át tartó immunitást eredményeznek a betegség ellen. Az IgG fehérjeszerkezetének meghatározása a vizsgált anyagban azt jelzi, hogy a test korábban találkozott egy kórokozóval és védő reakcióban van az újrafertőződés ellen.

Diagnózis indikációi

Egy enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot alkalmaznak a különféle fertőző betegségek, hormonális állapotok és allergiás tesztek meghatározására. Ugyanis:

  • meghatározza a pajzsmirigyhormonok szintjét;
  • a reproduktív hormonális panel mutatói;
  • tumorsejtek;
  • fertőző betegségek, például citomegalovírus, hepatitis, toxoplazma, rubeola, kanyaró, tuberkulózis, chlamydia, szifilisz, mikoplazma, ureplazma, Candida, giardia és még HIV kórokozóinak kimutatása;
  • diagnosztizálják autoimmun betegségeket. Beleértve az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot: A TSH-t, TG-t, T3-at és T4-et gyakran használják pajzsmirigyhormonok tanulmányozására.

A diagnosztikai célokon túl az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot orvosi kutatási tevékenységekben is felhasználják.

Hogyan készül az anyag??

A legtöbb esetben a vénás vérvételre van szükség az elemzéshez. A vizsgálathoz szükséges anyag feldolgozása és előkészítése után enzimkötő immunszorbens vizsgálatot végezünk vérszérum vagy plazma esetében.

A hormonális panel vizsgálata különös figyelmet igényel, mivel ebben az esetben rendkívül fontos figyelembe venni az anyagfelvétel tulajdonságait. Például a nők reproduktív rendszerében a legtöbb hormon diagnosztizálásához a menstruációs ciklus bizonyos napjain vénás vért kell venni. Számos más hormont befolyásolnak a külső tényezők: szezonalitás, a napszak, a páciens pszichológiai állapota és még sok más. Ha nem veszi figyelembe a konkrét tényezőket, akkor hamis eredményt kaphat, amely a betegség súlyosbodásához vagy a nem megfelelően előírt kezeléshez vezethet..

Bizonyos, gyakrabban bonyolult esetekben szükség lehet a terhes nő cerebrospinális folyadékára, üveges testére vagy amniotikus folyadékára. Ezeknek a biológiai anyagoknak a gyűjtésére szolgáló eljárások bizonyos kockázatot hordoznak, ellenjavallatokkal és helyreállítási periódussal rendelkeznek. Ezért egy ilyen enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot csak az orvos tanúvallomása alapján és szakmai felügyelete mellett szabad elvégezni. A dekódolás ebben az esetben speciális orvosi ismereteket igényel, és időt vehet igénybe.

Az elemzés előkészítése

Az enzimekhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatokat minden ajánlással összhangban kell elvégezni, mivel külső tényezők befolyásolják a vizsgálat eredményeit. Fontos például a vénás vér adományozása üres gyomoron reggel (legfeljebb 11 óra). 2 héttel az állítólagos anyagbevitel előtt abba kell hagynia minden gyógyszer szedését, különösen a hormonokat. Néhány nappal a vizsgálat előtt tartózkodnia kell az alkohol és a zsíros ételek fogyasztásától, valamint ki kell zárnia a fizikai aktivitást, a gondot és a stresszt..

Az eredmények titkosítása

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens teszt eredményeinek megfejtése speciális ismereteket igényel a fehérjeszerkezetek (antitestek) fentiekben ismertetett tulajdonságairól (IgG és IgM). Ezen adatokkal összhangban elemzik a kutatási mutatókat. A táblázat ismerteti az elemzés során beszerezhető lehetőségeket:

Enzim immunoassay: átirat
Immunoglobulinok MImmunoglobulinok GÁllítólagos dekódolás
negatívannegatívanA test soha nem tapasztalták ezt a fertőzést. Nincs kórokozó, és ellenanyagok sem.
negatívanpozitívanA test erős immunitást fejlesztett ki a fertőzésekkel szemben..
pozitívannegatívanAkut fertőzés formája.
pozitívanpozitívanValószínűleg elsődleges fertőzés, de további diagnosztikai vizsgálatokra van szükség.

A bemutatott táblázat elemzésével megállapíthatjuk, hogy a diagnózis megerősítéséhez a legtöbb esetben további vizsgálatok szükségesek. Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat önmagában nem adhat határozott választ. A normának ebben az esetben nincs egyértelmű határa: a G csoport által kimutatott fehérjék csak azt jelzik, hogy a test korábban egy meghatározott kórokozóval fertőzött. Ugyanez az eredmény utalhat akut fázis jelenlétére is - fontos a sok tényező és mutató összehasonlítása a helyes diagnózis érdekében.

Rizikó faktorok

Az ELISA 90% -kal pontos. Ennek ellenére vannak olyan kockázati tényezők, amelyek befolyásolják a diagnosztikai eredmény torzulását: a berendezés meghibásodása, nem megfelelő anyaggyűjtés, tárolás és szállítás, egyéb külső tényezők figyelmen kívül hagyása.

Nem ajánlott diagnosztizálni vérátömlesztés, hemolízis, műtét, biopszia vagy biológiai anyag szúrása után - ez a mutatók eredményére is hatással lehet.

Az elemzés költsége

A diagnosztikai vizsgálat költségei széles tartományban vannak, és függnek az elemzés típusától és a meghatározandó antigéntől, mivel ezen tényezők alapján kiszámítják a reagenskészletek költségeit és meghatározzák az elemzés bonyolultságát. De a legtöbb esetben az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat sok betegnél elérhető. Az ára 300 r-től kezdődik. 2000 r-ig.

Az ELISA megfizethető, gyors és nagyon hatékony módszer a betegségek nagy listájának diagnosztizálására. De csak egy képzett egészségügyi szakember jogosult megfejteni az eredményeket és diagnosztizálni.

ELISA elemzés - mi az, enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat dekódolása paraziták, szifilisz, HIV, tuberkulózis esetén. Normál a táblázatban, eredmények

A modern orvostudomány fejlődésének köszönhetően az orvosnak a diagnózis felállításakor már nem kell a betegségek közvetett megnyilvánulására összpontosítania, vagy többlépcsős laboratóriumi vizsgálatokat kell végeznie. Elegendő egy olyan elemzés elvégzése, amely megerősíti vagy megcáfolja az állítólagos kezdeti diagnózist..

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens módszer (ELISA) ez a módszer - ez a vizsgálat lehetővé teszi a különféle patológiákban rejlő specifikus antitestek és antigének kimutatását, ami nagyban felgyorsítja a diagnózist.

Mi az IFA?

Az ELISA elemzés laboratóriumi vizsgálat (módszer), amely segít meghatározni bizonyos antitestek jelenlétét vagy hiányát a testben a vírus elleni küzdelemhez és azok számát.

A vizsgálat alapja egy antigén (a testre ártalmas tárgy) - egy ellenanyag (a rosszindulatú objektumokat elpusztító fehérje) természetes reakciója, amely lehetővé teszi számos vírus és baktérium jelenlétének kimutatását.

Az ELISA a test természetes immunválasza - egy antitest kölcsönhatása a megfelelő antigénnel. Tehát az ELISA során az antigéneket vagy antitesteket felváltva adják a csőhöz az anyaggal, ezután kimutatják a kapott antigén-antitest komplexek koncentrációját.

Ha véletlen egybeesések alakulnak ki, akkor immunkomplexek alakulnak ki, akkor a színezőanyag enzimatikus reakciója következik be a kombinált molekulával. Az enzimes indikáció során bekövetkező színváltozás miatt a betegséget a kimutatott vegyület szintjének tanulmányozása után azonosítják.

Az immunglobulinok típusai

Az emberi immunglobulinok több osztályba sorolhatók, amelyek különböznek egymástól a nehéz láncok (H-láncok) tulajdonságai, szerkezete és antigénjei szempontjából. Valamennyi emlősben, beleértve az embereket is, öt H-láncot izolálunk, amelyek meghatározzák az immunglobulinoknak a megfelelő osztályba való tartozását: G, M, A, D, E.

Mindegyik osztály különbözik egymástól biológiai tulajdonságai, antigének kötő képessége, valamint a molekulához való kötődés sebessége és erőssége között..

Az egyes immunglobulinok (lg) funkciói különböznek:

Mennyiség a testbenFunkciókFelezési idő (nap)Érték
G70%Formáljon passzív immunitást az újszülöttben;

szükséges az immunválaszhoz

javítja a fagocitózist,

21-24tartós humorális immunitást biztosítanak fertőző betegségek esetén
M5-10%szükséges a fagocitózis aktiválásához,

képes megkötni 5 antigénmolekulát,

5Primer immunválaszt biztosít
ÉS10-15Semlegesítse a toxinokat és a vírusokat

szükséges a korai immunitás kialakulásához

Helyi immunitási oktatás

4-5Nyálkahártya védelem
E0,2%allergiákat okoznak és anafilaxiát aktiválnak a szöveti basofilek2Parazita védelem
D0,2%részt vesz a limfociták termelődésében, amely az antigének membránreceptorához szükséges;3Szerepüket nem értik jól.

Az immunglobulinok megjelenése egyfajta „láncban” - IgM IgG-ben fordul elő, így reagál a test az antigén megjelenésére a testben. A laboratóriumi diagnosztika során három fő immunglobulin - G, M, A - koncentrációjának becslése.

Az immunoglobulin elemzés indikációi

Az ELISA elemzés egyre népszerűbbé válik minden évben..

Egy ilyen vizsgálat felgyorsítja a diagnózist, és ez nagyon fontos az ilyen kóros betegségek kezelése során, mint például:

  • vírusos májgyulladás;
  • HIV-fertőzés;
  • citomegalovírus,
  • Epstein-Barr vírus,
  • herpesz vírus,
  • kanyaró
  • rubeola,
  • tuberkulózis,
  • szalmonellózis,
  • vérhas,
  • kullancsos encephalitis,
  • Helicobacter baktériumok,
  • borreliosis,
  • tetanusz,
  • szifilisz,
  • torokgyík,
  • leptospirosis,
  • chlamydia,
  • ureaplasmosis,
  • mycoplasmosis,
  • szamárköhögés.

Az elemzés lehetővé teszi a parazita-fertőzés meghatározását:

  • flatworms
  • orsóféreg
  • szövettani améba,
  • máj megremeg,
  • lamblia,
  • toxoplasma,
  • trichinella,
  • máj-,
  • cestodoses.

Az ELISA az autoimmun patológiák és a rosszindulatú daganatok egyfajta markere.

Felkészülés a tesztre

A tanulmány előkészítése során be kell tartania az alábbi szabályokat:

  • egy nappal a vérvétel előtt nem dohányozhat és fogyaszthat alkoholt,
  • ne vegyen részt sportban vagy más fizikai tevékenységekben,
  • próbálja elkerülni a stresszt,

Az ELISA elemzés elvégzése előtt el kell kerülnie a stresszt.

  • legkésőbb 10 nappal a manipuláció előtt hagyja abba a drogok használatát.
  • Az orvosok speciális diétát is javasolnak - zárja ki a zsíros és a sült ételeket, és ha a vizsgálatot hepatitiszre végzik, akkor ne használjon semmilyen narancs zöldséget és különösen a citrusféléket. Adományoz vért reggel üres gyomorra.

    A téves pozitív elemzés a nem teljesített ajánlásoknak köszönhető, különösen a zsíros ételek használata miatt, ami túl magas triglicerid-koncentrációhoz vezet a plazmában, amelynek következtében csökken az ELISA vezetőképessége.

    Mintavételi eljárás

    Teljes vér, szérum vagy vénás vérplazma használható teszt anyagként. Anyagmintavétel, általában a ulnara vénából, ehhez egyszer használatos tűt és vákuumcsövet kell használni, 5-10 ml vért kell használni.

    Az eredmény pontossága szempontjából fontos, hogy betartsa a helyes mintavételi technikát - magát az érét és a környező szöveteket egy manipulációval kell elvégezni, ezért egy nagy átmérőjű rövid tűt kell használni, tehát a véna ellenkező falának nincs sérülése és a vörösvértestek nem sérültek..

    Ezenkívül a vörösvértestek integritásának megőrzése érdekében szükséges, hogy a vér áramoljon le a cső falán.

    Az anyag tárolása során el kell kerülni annak lehetséges ionizációját, továbbá az anyagnak nem szabad érintkeznie a fertőtlenítőszerek maradékaival, ezért csak eldobható műanyag csövet használnak, a beteg nevével, az anyag kézbesítésének dátumával és idejével..

    Ha a vizsgálati anyag rövid tárolására van szükség, akkor hűtőszekrényt kell használni, amelynek hőmérséklete 2–4 ° C, ha hosszabb tárolásra van szükség, akkor az anyagot –20 ° C hőmérsékleten fagyasztják le..

    Hogyan történik az elemzés?

    A vizsgálati anyag elkészítése után a laboratóriumi asszisztens folytatja a szükséges manipulációkat. Ehhez számos speciális antigénkészletet használnak, amelyek lehetővé teszik a test reakciójának ingerlésre provokálását, ezek különféle fertőzések, hormonok, allergének.

    Az elvárt antigén-antitest reakciórendszer hasonlóképpen néz ki:

    • Az elsődleges reakció a kimutatható Ig (Ab) és a tisztított patogén antigén (Ag)..
    • A kapott immunkomplexek kimutatására egy új immunológiai reakció következik, amikor egy specifikus specifikus Ig antigénként hat, és a konjugált Ig (Ab) ellenanyagként viselkedik.
    • Az utolsó lépés egy enzimatikus reakció, egy katalizátor-konjugált molekulával együtt. A szubsztrátum egy kromogén (nem festett), amely a reakció folyamán elszíneződik, és a színintenzitás határozza meg a mintában szereplő immunoglobulin mennyiségi mutatóját.

    Jelenleg sokféle ELISA lehetőséget fejlesztettek ki, és nincs egyértelmű besorolása. Általában a módszereket heterogén és homogén elkülönítésre alapozzák - az elemzés minden fázisa szilárd vagy csak oldatot használ..

    A modern klinikai diagnosztikai laboratóriumok általában heterogén (szilárd fázisú) ELISA-t használnak, amelyben a szilárd fázis az antigének vagy ellenanyagok abszorpcióját jelenti a polisztirol mikrotáblán elhelyezkedő speciális kutak szilárd felületén. A módszert közvetlen és közvetett ELISA-ra osztják..

    Közvetlen ELISA módszerrel a bevezetett antigén az inkubációs folyamat során fixálódik az üres kutak felületén; ehhez a vizsgált anyagmintákat tiszta lyukakba helyezzük 20-25 percre, ehhez az antigént felületükhöz kell rögzíteni. Ezután hozzáadjuk a szükséges antitesteket. Ezenkívül az anyag egy ideig ideig marad, hogy kötéseket képezzen.

    Az antitestek mindig többlettel vannak hozzáadva, így még ha vannak is, a kötött antigének maradnak a mintában, és ha egyáltalán nincsenek antigének, akkor nem lesznek kötések. Az "extra" antitestek eltávolításához dekantálást végzünk, miután csak azok az antitestek maradnak fenn, amelyek kapcsolatot létesítettek az antigénnel.

    Ezután egy enzimatikus reakciót követünk - az enzim oldatát adjuk a lyukakhoz, majd a kapott kötéseket megfestjük.

    Az indirekt ELISA módszernél az alkalmazott antitestek előzetesen kapcsolódnak az enzimatikus reakció szubsztrátumához; ebben az esetben az ellenanyagok kötődése az antigénhez az inkubációs folyamat során megy végbe, amelyet követően a kötegeket mobilizálnak a kutak felületére, és a reakció után bevitt konjugátum és szubsztrát-kromogén reagens megfesti a reakciót.

    Így a közvetett módszer és a közvetlen módszer közötti fő különbség nem az anyag ragasztása a tiszta kutak felületére, hanem a tablettán rögzített antigénhez történő kötés.

    A reakció leáll a speciális eszközök használatával, majd minden lyukon fotometrikus folyamaton megy keresztül, amelyet az előzőleg elvégzett kontrollmintákkal kapott eredmények összehasonlító leírása követ..

    Ha a mintában az optikai sűrűség növekedését észlelik, akkor a specifikus antitestek koncentrációját a teszt eredményében szintén túlbecsülik..

    Mikor készül az elemzés?

    A vizsgálat nem vesz sok időt, a vérvételtől az eredmény megszerzéséig - a diagnosztikai intézkedésektől függően 1-10 napig tart..

    Teszteredmények és értelmezésük

    A beteg által kapott formában a diagnosztikai eredmény negatív vagy pozitív eredményt jelez bizonyos immunoglobulin-osztályok esetében, valamint az antitestek különböző osztályainak mennyiségi mutatóját is.

    Az eredmények eltérő értelmezése lehetséges:

    1. IgM (+) (IgA, IgG nincs meghatározva) - a gyógyulási folyamat;
    2. IgM (-); IgG (+), IgA (+) - krónikus fertőző patológia;
    3. IgM, IgG, IgA (mindegyik értéke) - a fertőzések elleni védő mechanizmusok hiánya;
    4. IgG (+/-) és IgA (+/-), IgM (+) - akut folyamat;
    5. IgM (-), IgA (-), IgG (+) - fertőzés utáni immunitás;
    6. IgM, IgG, IgA (+) - krónikus patológia akut stádiumban.

    Tehát például, ha IgG-t és IgM-et észleltek, akkor a betegnek a következő betegségek egyikét is élheti:

    • vírusos májgyulladás;
    • citomegalovírus;
    • herpesz;
    • bárányhimlő;
    • chlamydia
    • sztafilokokkusz vagy streptococcus fertőzés.

    A hormonális vizsgálatokhoz gyakran elő kell írni egy enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot, a normákat a táblázat tartalmazza:

    Hormon nevePadlóNorma
    1thyreoglobulinm / fLegfeljebb 70 NE / ml
    2tiroxinm / f64-146 nmol / l
    3trijódthyroninm / f1,8-2,8 nmol / L
    4Tiroxin mentesm / f11-25 pmol / L
    5Ingyenes triiodritoninm / f4,49-9,3 pmol / L
    6Tesztoszteron, dehidrotestoszteronF0,5-10 mU / l

    Az ELISA elemzés egy olyan diagnosztikai vizsgálat, amely lehetővé teszi a rákos patológiák kialakulásának valószínűségének felmérését. Az eredmények értelmezését azonban csak a kezelőorvos végzi.

    A teszt eredmények értéke

    Az ELISA alkalmas a nemi fertőzések különféle formáinak, köztük a szifilisznek a kimutatására, gyakran terhes nők szűrésére..

    Ennek a tanulmánynak köszönhetően megtudhatja, hogy a fertőzés és a betegség stádiuma mennyi ideig fordult elő a vizsgálat idején:

    • M immunglobulinok jelzik a betegség időtartamát;
    • IgA - a beteg több mint 30 nappal ezelőtt fertőzött;
    • Az IgG megtalálható a betegségek „csúcsán”, vagy abban a pillanatban, amikor a kezelés a közelmúltban véget ért.

    A vizsgálat során a tányér negatív indikátorral ellátott üregei színtelenek maradnak, a pozitívok élénk sárga színűek. Ha a pozitív mélyedések színe nem egyezik a kontroll színével, akkor az eredményt kétesnek tekintik, és ismételt vizsgálat szükséges..

    Az enzim-kapcsolt immunszorbens vizsgálat az első lépés a HIV diagnosztizálásában. Az elemzést közvetlenül az állítólagos fertőzés után lehetetlen elvégezni, meg kell várni az inkubációs időszak végéig (14 naptól 6 hónapig)..

    Az elemzés során meghatározzuk a HIV-1 és HIV-2 elleni antitesteket, megvizsgáljuk a G osztályú antitesteket, amelyek általában egy későbbi időpontban jelennek meg, valamint az A és M osztályú antitesteket a korai szakaszban (az inkubációs időszak alatt)..

    A pozitív minták kézhezvételekor a következőknek kell lenniük:

    • ha az első teszt pozitív eredményt adott, akkor a vért egy másik laboratóriumi asszisztens ismételten ellenőrzi;
    • az ismételt pozitív eredmény magában foglalja az anyag újraértékelését,
    • az eredmény megismétlésekor a beteget immunoblot-ra osztják.

    A HIV-fertőzés jelenlétére vonatkozó végső következtetést csak az immunoblot eredménye után adják ki.

    Az ELISA-t a tuberkulózis diagnosztikai vizsgálatához is használják, de még ha a betegnél is vannak ellenanyagok ennek a patológiának, ez nem mindig igazolja a tuberkulózis jelenlétét, ezért az ELISA-t gyakran finomítási módszerként vagy rejtett extrapulmonalis forma diagnosztizálására használják..

    Az ELISA elemzés olyan vizsgálat, amely lehetővé teszi a betegek parazitákkal és protozoákkal történő fertőzésének kimutatását, a diagnózis során akár a fertőzés idejét is meghatározhatja.

    ChlamydiaA citomegalovírusparaziták
    IgM - a fertőzés után 7 nappal kimutatható,Az IgM-et a fertőzés után 30–45 nappal, vagy a fertőzés újbóli aktiválásakor 4-6 hónapon keresztül lehet kimutatniA vizsgálat meghatározta az IgME-t.

    IgG - az invázió krónikus stádiuma

    IgA - fertőzés több mint 30 nappal ezelőtt történt
    IgG - invázió az akut szakaszban van
    IgG - megerősíti a diagnózist és megmutatja a terápia hatékonyságát

    Az elemzés előnyei és hátrányai

    Az IFA-nak számos előnye van, ami magyarázza népszerűségét az orvosok és a betegek körében:

    • az eredmény nagy pontossága,
    • megfizethető áron,
    • gyors eredmény,
    • a betegség stádiumának azonosítása,
    • a betegségkezelés dinamikája.

    Az előnyök mellett azonban van egy hátrány is - ritkán az elemzés hamis pozitív vagy hamis negatív.

    Miért lehet, hogy az eredmény nem megbízható?

    Ennek eredményeként hibák merülhetnek fel technikai megsértések miatt, az elemzés nem megbízható azokban a krónikus betegségekben (rheumatoid factor) szenvedő embereknél is, akikre jellemző a specifikus ellenanyagok előállítása.

    A végső eredményt befolyásolja továbbá a betegek gyógyszereinek és az anyagcsere-rendellenességeknek a használata. Ezen okok miatt a pozitív HIV és rákos teszt ismételt tesztet igényel.

    Kutatási költség

    Az ELISA ára a diagnózis irányától függ (rubel):

    • hepatitis 250-900;
    • vírusok - 250-1000;
    • HIV - 250-350;
    • helmintikus fertőzések - 280 - 900;
    • szifilisz -150-250;
    • gombás fertőzések 400-500.

    Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat az egyik leghatékonyabb módszer számos vírusos, parazita fertőzés és onkológiai patológia tanulmányozására. Egy olyan vizsgálat, mint például az ELISA, nagyban megkönnyíti a diagnózist, azonban ezt az elemzést a betegnek nem szabad önmagában értelmeznie, csak az orvosnak kell foglalkoznia a dekódolással.

    Írta: Bacio

    A cikk tervezése: Lozinsky Oleg

    Fontos, Hogy Tisztában Dystonia

    • Ischaemia
      Monocytosis
      A monociták fő funkcióiA monociták morfológiai felépítésükben nagyon hasonlítanak a limfoblasztokra, bár jelentősen különböznek azoktól a limfocitáktól, amelyek fejlődésük szakaszát már meghaladták és elérték az érett formát.